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miRNA茎环法引物设计工具

基于miRNA序列设计茎环法qPCR引物

miRNA茎环法引物设计工具:基于茎环反转录引物(Stem-loop RT Primer)的qPCR检测方法,特异性高,是miRNA定量检测的金标准方法。

🧬 茎环法原理

茎环反转录引物通过其茎环结构与miRNA的3'端特异性结合,在逆转录酶作用下合成cDNA第一链。随后使用正向引物(miRNA特异性)和通用反向引物进行qPCR扩增。

特点:特异性高、灵敏度高、可区分成熟miRNA与前体、适用于低丰度miRNA检测。

输入参数

输入miRNA成熟体序列(5'→3'方向),长度通常为20-24 nt。